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PAS糖原染色揭示細(xì)胞能量?jī)?chǔ)備的重要工具
點(diǎn)擊次數(shù)：755 更新時(shí)間：2023-08-28
PAS（Periodic Acid-Schiff）糖原染色是一種常用于組織學(xué)和病理學(xué)領(lǐng)域的染色技術(shù)。它通過(guò)特定的化學(xué)反應(yīng)，將組織中的糖原著色為紫紅色，從而可以清晰地觀(guān)察和評(píng)估細(xì)胞內(nèi)糖原的分布和含量。本文將介紹PAS糖原染色的原理、實(shí)施步驟以及其在醫(yī)學(xué)診斷和科學(xué)研究中所起到的重要作用。
PAS（Periodic Acid-Schiff）是一種經(jīng)典的組織染色方法，最早由Schiff于1867年發(fā)明。該方法通過(guò)氧化劑與堿性條件下還原性物質(zhì)之間產(chǎn)生顯微觀(guān)察可見(jiàn)顏色反應(yīng)來(lái)顯示有機(jī)物結(jié)構(gòu)。在PAS糖原染色中，主要目標(biāo)就是觀(guān)察和評(píng)估組織樣本中存在的糖原含量。
PAS糖原染色主要依賴(lài)于兩個(gè)關(guān)鍵步驟：周期酸氧化和Schiff試劑還原。2.1周期酸氧化：首先，組織樣本被經(jīng)過(guò)一定時(shí)間的周期酸處理。周期酸（Periodic Acid）能夠選擇性氧化糖原中的羥基，將其轉(zhuǎn)化為醛基。2.2 Schiff試劑還原：接下來(lái)，在周期酸處理后，樣本通過(guò)Schiff試劑進(jìn)行染色。Schiff試劑通常由亞硫酸與伊紅反應(yīng)而成。它可以還原周期酸氧化產(chǎn)生的醛基，并形成紫紅色沉淀。
PAS糖原染色步驟3.1取得組織樣本：首先，需要取得要進(jìn)行PAS糖原染色的組織樣本。3.2固定和包埋：將組織樣本固定在適當(dāng)?shù)墓潭ㄒ褐校⑦M(jìn)行脫水和包埋。3.3制備切片：使用微型切片機(jī)或手工切片方法制備薄切片。3.4染色操作：3.4.1去蠟：將切片浸入去蠟溶液中，去除包埋時(shí)所使用的蠟質(zhì)。3.4.2去水和再度水合作用：通過(guò)浸入不同濃度乙醇溶液使組織脫水，然后使用去離子水進(jìn)行再度水合作用。3.4.3周期酸氧化：將切片浸入周期酸溶液中，在適當(dāng)?shù)臏囟群蜁r(shí)間下進(jìn)行氧化反應(yīng)。3.4.4再次洗滌：使用去離子水對(duì)切片進(jìn)行洗滌以去除多余的周期酸溶液。3.4.5 Schiff試劑染色：將切片浸入Schiff試劑中，使其與被周期酸氧化的糖原發(fā)生反應(yīng)形成紫紅色沉淀。3.4.6洗凈和固定：使用流動(dòng)的自來(lái)水沖洗切片，并繼續(xù)在硼酸緩沖液中浸泡一段時(shí)間以穩(wěn)定染色結(jié)果。
